NCI-H69人小细胞肺癌细胞

细胞详情
细胞名称
NCI-H69人小细胞肺癌细胞
货 号
SAc0292
组织来源
55白种人男性；肺，小细胞肺癌
生长方式
悬浮聚团生长
描 述
该细胞系为非整倍体，在软琼脂中形成集落，保留小细胞癌的形态、超微结构及APUD细胞特征。细胞聚集生长，因此细胞计数不准确。细胞角蛋白染色阳性。N-myc基因被扩增，并有mRNA和蛋白的表达。C-myc mRNA的表达水平较低，而不是蛋白。有c-myb、v-fes、v-fms、c-raf1、Ha-ras、Ki-ras和N-ras mRNA的表达。
培养条件
1640，10%FBS；空气95%，二氧化碳5%；37℃培养
换液频率
半换液法，直接补充新鲜培养基
传代周期
细胞密度不宜超过1-2×106细胞/ml
传代比例
接种细胞密度在2-3×105细胞/ml
冻存液配方
95%完全培养基，5%DMSO
安全性
BSL-1
供应限制
仅供研究之用。
细胞系收货须知
收到的货物会包含以下几种类型，您的货物属于：
□细胞冻存管：收到货物后，请检查箱子里面是否还有干冰。
● 若干冰已剩余不多，不能掩埋冻存管，请及时拍照，并第一时间联系销售。
● 若干冰充裕，可以安排复苏细胞；不安排复苏，请将细胞冻存管转移到液氮进行保存。短期（一周内）的存放可以放在-80冰箱，建议最好保存在液氮中。
□培养瓶的活细胞：收到请检查培养瓶是否完好，是否有漏液，培养基是否浑浊
●若出现以上问题请于当天和我们销售取得联系，我们会第一时间为您处理。
● 若以上问题都没有出现:拆掉培养瓶的外包装，在显微镜下对细胞进行多个视野，不同倍镜拍照。然后用酒精对瓶身进行彻底消毒，放在37度二氧化碳培养箱中进行复温。1-2小时后，拿出在显微镜下观察，并进行多个视野不同倍镜拍照。若细胞达到了可以传代的密度，请及时进行传代。若细胞密度不能进行传代，请回收培养瓶中的培养基，留适量培养基在瓶中，并将培养瓶放在培养箱继续培养即可。
□消化后的细胞悬液：收到请检查管子是否有漏液
●若漏液，请当天和我们销售取得联系，我们会第一时间为您处理。
●若完好，将管子用酒精彻底消毒，收集细胞悬液到离心管，1000转，离心5分钟，弃上清，加入培养基重悬，按照 比例分装到 个T25培养瓶，并补充培养基到 ml即可。
细胞操作详细步骤
--悬浮细胞
1.细胞复苏
1.1准备一个T25的细胞培养瓶并做好标记，预热好的细胞完全培养基，一支15ml离心管，离心管中加入4-5ml细胞完全培养基。
1.2取出细胞冻存管，在37度水浴中快速解冻，将管子擦干消毒后迅速拿回生物安全柜。
1.3将细胞悬液转移到加有培养基的离心管中，1000转离心5分钟。
1.4倒掉上清，加入培养基轻轻重悬细胞亦可先将细胞团弹散后加入培养基混匀。
1.5将重悬好的细胞转移到T25细胞培养瓶，补充培养基到5ml左右，十字摇晃，将细胞铺匀后放入培养箱培养。
2.细胞传代
2.1细胞密度达到1-2×106细胞/ml时，1000转离心5分钟收集细胞，弃上清，加入新鲜培养基，使细胞密度在2-3×105细胞/ml.
2.2细胞密度达到1-2×106细胞/ml时，将培养瓶中的细胞悬液分装到新的培养瓶，并补充新鲜培养基，使细胞密度在2-3×105细胞/ml.
3.细胞冻存
将培养瓶中的细胞悬液转移到离心管中，1000转离心5分钟收集细胞，弃上清，加入冻存液，重悬细胞，并分装到冻存管，冻存密度2-3×106细胞/ml。将冻存管放入程序降温盒，并放到-80℃冰箱，过夜后将冻存管转移到液氮保存。
4.注意事项
4.1建议收到细胞后先用我们配套的培养基和血清。收到活细胞的客户培养瓶中的培养基可回收使用，保存在4度可使用一周。
4.2不同实验室操作上会有些许差异，为了避免细胞不适应，请先按照说明书推荐的方法和操作步骤培养，待细胞冻存后可根据自己的习惯操作看细胞是否能够适应。
4.3建议收到细胞后，前几代及时冻存一些细胞，并最好是可以多冻存几个批次。